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AB Qtrap 5500在蛋白质组学定量分析中的新技术及其新应用
发表时间:2023/11/22 10:06:18  |  点击率:743

高效实现强大的MRM3定量方法

AB Sciex公司推出的Qtrap 5500系统具备高的灵敏度、好的阱内裂解效率、快的扫描速度以及更快的MRM3扫描方式。在分析生物样品时,样品一般都较为复杂,所以在某些特殊的情况下,分析人员需要选择性更高的检测技术,MRM3技术便能够帮助分析人员解决上述问题。

所谓MRM3扫描方式就是通过Qtrap 5500质谱系统与液相色谱相配合,在Q1选择一个前体离子,在Q2中将该离子进行碎裂,与MRM扫描方式不同在于MRM3扫描方式是将所有的碎片离子聚集在线性加速离子阱中,之后,在离子阱中以高达10K20KDa/Sec的速度扫描特定的二代碎片离子,从而获得MRM3谱图。

(1)MRM扫描背景噪音较高,或谱图中有干扰峰存在;(2)通过更换流动相、优化液相色谱条件、选择不同的MRM离子对、选择不同的离子化方式等这些简单方法无法消除背景噪音;(3)与背景噪音相比,没有特定的MRM子离子可用,在遇到上述这些干扰和困难时,MRM3就是一种有效的定量策略。

脂质分析

脂类物质是细胞膜的重要组成成分,在细胞功能上扮演着重要的角色,所有的脂类都有一个极性头部和熟睡的尾巴,或至少是代谢后生成此类分子。作为细胞能量储存,并且参与细胞间的信息交换。了解脂类代谢途径有益于设计高效且副作用小的药物,对于生物体生理过程和药物设计有着重要的意义。譬如阿司匹林、布洛芬与脂类代谢相关,降低胆固醇的他汀药物,也能戏剧性的改变脂类代谢。

传统研究脂类物质的技术方法包括有:薄层层析、气相色谱以及气质联用技术。气质联用技术通常分析经分离纯化的脂类衍生物,但衍生化方法通常易导致脂类发生变化,破坏了脂类分子的完整性。

液质联用技术可以解决上述问题,帮助分析人员鉴定脂类、了解脂类类别、获得脂类的表达谱、比较脂类表达谱、获得结构信息、测定分子量以及代谢物定量。LC/MS/MS不同于GC/MS,它可使研究人员能够观察到完整的脂类分子,直观地看到何种脂肪酸连接在头部基团上。

多重全体离子扫描方式(MPIS)

多重全体离子扫描方式具体指指固定在Q3扫描某个碎片离子,通过分析检测出哪个前体离子会产生出该碎片离子,并将该离子的信号记录下来。通过这样反复不断地扫描,便可以推导出哪些前提离子将会产生某一个碎片离子。该方法的技术优势在可对所有感兴趣的脂类分子和内标分子进行平行检测,图谱了直观解析并可以叠加用于复杂脂类的定性分析,可方便的从前提离子扫描切换到MRM扫描,用于脂类分子的定量分析。

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